Lima sistem utama kromatografi cair adalah sebagai berikut:
1. Sistem injeksi
Umumnya, sampler injeksi diafragma atau ruang injeksi bertekanan tinggi digunakan untuk menyelesaikan operasi injeksi, dan volume injeksi konstan.
Hal ini bermanfaat untuk meningkatkan reproduktifitas sampel analitik.
2. Sistem infus
Sistem ini terdiri dari tiga bagian: pompa bertekanan tinggi, reservoir fase gerak, dan gradiener. Tekanan umum pompa bertekanan tinggi adalah 1,47~4,4X107Pa, dan laju aliran dapat disesuaikan dan stabil. Ketika fase gerak bertekanan tinggi melewati kolom kromatografi, dapat mengurangi efek difusi sampel dalam kolom dan mempercepat kecepatan pergerakannya dalam kolom. Hal ini bermanfaat untuk meningkatkan resolusi, memulihkan sampel, dan menjaga aktivitas biologis sampel. Kesalahan penyimpanan fase gerak dan gradien dapat mengubah fase gerak sesuai dengan sifat fase diam dan sampel, termasuk mengubah polaritas eluen, kekuatan ion, nilai pH, atau beralih ke metode lain.
3. Sistem pemisahan
Sistem ini mencakup kolom kromatografi, tabung penghubung, dan termostat.
Panjang kolom kromatografi umumnya 10-50cm (jika diperlukan kombinasi dua, tabung penghubung dapat ditambahkan di antara keduanya), dengan diameter dalam 2-5mm. Itu terbuat dari baja tahan karat berkualitas tinggi, tabung kaca berdinding tebal, paduan titanium, dan bahan lainnya. Kolom dilengkapi dengan diameter 5-10 μ Fase tetap dengan ukuran partikel m (tersusun dari matriks dan cairan tetap), dimana matriks tersebut terdiri dari resin atau silika gel berkekuatan mekanik tinggi, keduanya mempunyai ciri-ciri kelembaman (seperti penghilangan dasar gen silikat pada permukaan gel silika), porositas, dan luas permukaan spesifik yang besar, Selain itu, permukaannya dilapisi secara mekanis (mirip dengan pembuatan fasa diam pada kromatografi gas) atau digabungkan secara kimia dengan berbagai gen (seperti gugus fosfat, amina kuaterner, hidroksimetil, fenil, amino atau alkil dengan berbagai panjang rantai karbon) atau ligan.
Oleh karena itu, jenis zat dengan struktur relatif tetap yang berbeda ini memiliki selektivitas yang baik. Misalnya, dengan menggabungkan pea lectin (PSA) pada permukaan gel silika berpori, glikoprotein dapat diisolasi dari fibroblas. Selain itu, plasmid fase diam berukuran kecil, dan dasar kolom mudah untuk mencapai keadaan seragam dan padat, yang dapat sangat mengurangi efek difusi arus eddy. Matriks memiliki ukuran partikel kecil dan pori mikro yang dangkal, dan sampel memiliki perpindahan massa yang pendek di area mikropori. Ini bermanfaat untuk mengurangi bandwidth dan meningkatkan resolusi. Menurut analisis teori efisiensi kolom, semakin kecil ukuran partikel matriks, semakin besar jumlah teoritis N baki.
4. Sistem deteksi
Ada tiga detektor yang umum digunakan untuk kromatografi cair: detektor UV, detektor indeks bias diferensial, dan detektor fluoresensi
Detektor UV
Detektor ini cocok untuk mendeteksi sampel dengan kinerja penyerapan sinar ultraviolet (atau cahaya tampak).
Karakteristiknya: berbagai aplikasi (seperti protein, asam nukleat, asam amino, nukleotida, peptida, hormon, dll. dapat digunakan); Sensitivitas tinggi (batas deteksi 10-10g/mL); Rentang linier yang luas; Tidak sensitif terhadap perubahan suhu dan laju aliran; Dapat mendeteksi sampel yang dielusi oleh larutan gradien.
5. Sistem pengolahan data
Sistem ini dapat mengumpulkan, menyimpan, menampilkan, mencetak, dan memproses data pengujian, memungkinkan pemisahan, persiapan, atau identifikasi sampel dengan tepat.
Secara ringkas, kromatografi cair terdiri dari sistem sampel, sistem infus, sistem pemisahan, sistem deteksi, dan sistem pengolahan data. Kombinasi sistem ini menjadikan eksperimen lebih andal dan stabil.